上海氣相色譜儀利用氣相色譜層析技術(shù)做為微生物診斷的工具已成功地用于微生物的分類和鑒定。該法敏感性強(qiáng)，能夠分離和檢測(cè)到毫微克的水平。上海氣相色譜儀具有快速的特點(diǎn)，常在數(shù)十分鐘甚至數(shù)小時(shí)就可以對(duì)傳染病做出早期診斷。其結(jié)果穩(wěn)定，重復(fù)性好，但不足之處是操作中各因素不易控制，方法不易標(biāo)化等。
上海氣相色譜儀的基本部件（層析柜）
1.譜柱及加熱爐色譜柱一般由金屬或玻璃制成，通常采用的柱長(zhǎng)2m~4m，內(nèi)徑2mm, 毛細(xì)管柱長(zhǎng)度可達(dá)20m～150m，內(nèi)徑為0.2mm。
2．載氣上海氣相色譜儀常用的載氣主要有氮、氬、氫和二氧化碳等。這些氣體一般都由高壓氣瓶供給。
上海氣相色譜儀載體一般采用惰性、多孔的固體顆粒。多由硅藻土或玻璃珠制成，分析不同極性的微生物化合物，為了獲得zui適的分離條件，上海氣相色譜儀要求有不同固定相的載體。目前比較常用的載體有：聚乙二醇（CarbOwax 20M）、F F A P（聚乙二醇20M和2-硝基對(duì)苯二甲酸的反應(yīng)產(chǎn)物），OV—17（苯基甲基硅酮）。OV-210、SE-30（甲基硅酮）、Chromosorb G（白色硅藻土載體）等。上海氣相色譜儀柱加熱爐在溫度控制上是非常重要的。
3．上海氣相色譜儀進(jìn)樣器可以用于分離固相、氣相和液相標(biāo)本。液相標(biāo)本采用微升注射器穿過橡皮隔片注入，上海氣相色譜儀氣相標(biāo)本采用特種氣相注射器注入。
4． 紀(jì)錄儀
5． 數(shù)據(jù)處理裝置上海氣相色譜儀一般均附有數(shù)據(jù)處理計(jì)算機(jī)。
上海氣相色譜儀試驗(yàn)條件的選擇
1．柱溫選擇上海氣相色譜儀柱溫選擇對(duì)分離度影響很大，常是條件選擇的關(guān)鍵。選擇的基本原則是：在使zui難分離的組分有盡可能好的分離高度的前提下，上海氣相色譜儀盡可能采取較低溫度，但以保留時(shí)間適宜及不拖尾為度。
⑴ 高沸點(diǎn)混合物（200℃～400℃），若需在較低的柱溫下分析，
上海氣相色譜儀可采用低固定液配比1％～3%，采用高靈敏檢測(cè)器，柱溫可比沸點(diǎn)低100℃～150℃，在200℃～250℃的柱溫下分析。
⑵ 上海氣相色譜儀沸點(diǎn)＜300℃的樣品，可用3％～25%固定液配比。沸點(diǎn)越低，所用配比越高，柱溫可比平均沸點(diǎn)低50℃至平均沸點(diǎn)的范圍選擇。
2．載體選擇 載體采用低線速時(shí)，宜用氮?dú)猓桓呔€速時(shí)用氫氣。柱越長(zhǎng)，上海氣相色譜儀柱內(nèi)有較大壓力降，宜用氫氣。載氣采用低線速時(shí)為20ml～80ml/min。
3．上海氣相色譜儀色譜柱的選擇 要注意極性及zui高使用溫度，柱溫不能超過zui高使用溫度。上海氣相色譜儀固定相按極性相似的原則選擇。
色譜柱的內(nèi)徑大小、長(zhǎng)度都能影響分離率。一般而言，內(nèi)徑越小，長(zhǎng)度越長(zhǎng)，分離效果越好，上海氣相色譜儀一般柱長(zhǎng)為1m～5m（毛細(xì)管柱則20m～100m）。
上海氣相色譜儀填充劑顆粒一般采用40目～60目，60目～80目及80目～100目大小。上海氣相色譜儀長(zhǎng)柱子宜用粒度大些的，以減少柱壓降，短柱子則用粒度細(xì)的。
氣相色譜中固定液的含量對(duì)分離效率的影響較大。上海氣相色譜儀一般采用固定液與載體重量之比為15︰100～25︰100。采用高靈敏度的檢測(cè)器，上海氣相色譜儀由于進(jìn)樣量減少，固定液含量可以降至5︰100以下。這樣可以使用較低柱溫，從而提高柱效，縮短分析時(shí)間。上海氣相色譜儀但固定液用量太少會(huì)引起吸附。
4．上海氣相色譜儀其它條件
⑴ 氣化室溫度及檢測(cè)室溫度選擇：氣化溫度取決于樣品的揮發(fā)性、沸點(diǎn)、穩(wěn)定性以及進(jìn)樣量，一般選擇稍高于樣品沸點(diǎn)，上海氣相色譜儀但不要超過沸點(diǎn)50%以上，以防分解。檢測(cè)室溫度需高于柱溫，一般高于柱溫30℃左右或與氣化室同溫。
⑵ 上海氣相色譜儀進(jìn)樣量：固定相在配比15％～35%的層析柱時(shí)，zui大進(jìn)樣量液體為10μl，氣體為10ml。一般樣品量液體4μl，氣體為0.5ml～3ml，固體小于1mg。
⑶ 上海氣相色譜儀橋電位選擇：散熱多和選擇大的橋電位，在靈敏度相同的情況下，應(yīng)盡量選擇低橋電位，上海氣相色譜儀以保護(hù)熱敏元件。
上海氣相色譜儀層析是一種分離分析的方法，因此上海氣相色譜儀的特點(diǎn)是適合于多組分混合物的定性和定量分析。
1．定性上海氣相色譜儀對(duì)于一已知范圍的混合物，用此法定性很容易，但對(duì)于范圍未知的混合物來說，上海氣相色譜儀則需要配合化學(xué)分析及其它儀器分析等。
⑴ 利用保留值定性法：上海氣相色譜儀同一種物質(zhì)在一根層析柱上保留時(shí)間相同。取樣品各可能組分的純物質(zhì)加入樣品中，混合進(jìn)樣，對(duì)此上海氣相色譜儀加入后的色譜圖，若某色譜峰相對(duì)譜高，則該色譜峰的組分與純物質(zhì)可能為同一物質(zhì)。
⑵ 化學(xué)反應(yīng)定性法：即把色譜柱的流出物，上海氣相色譜儀通過官能團(tuán)試劑中，觀察試劑的顏色是否發(fā)生變化或是否有沉淀，上海氣相色譜儀而判斷該組分含什么官能團(tuán)或?qū)儆诤晤惢衔铩?/div>
⑶ 上海氣相色譜儀兩譜聯(lián)用定性法：即利用質(zhì)譜儀、紅外分光光度計(jì)等來進(jìn)行測(cè)定，定性。
2．定量 在實(shí)驗(yàn)條件恒定時(shí)，峰面積或峰高與組分的含量成正比，因此可以利用峰面積或峰高面積或峰高來進(jìn)行定量。上海氣相色譜儀對(duì)于微生物標(biāo)本的氣相色譜分析常根據(jù)以下幾點(diǎn)來進(jìn)行比較。
⑴ 上海氣相色譜儀峰的有無和峰的大小。
⑵ 按10個(gè)重復(fù)標(biāo)本分析計(jì)算的平均t值（標(biāo)準(zhǔn)差）。
⑶ 同標(biāo)準(zhǔn)化合物的相對(duì)保留時(shí)間進(jìn)行對(duì)比，上海氣相色譜儀而對(duì)某化合物做出鑒定。
